ПЦР — это полимеразная цепная реакция. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) является мощнейшим инстументом современной молекулярной биологии.
Суть анализа ПЦР на гепатит В и его результаты
Если результат ПЦР отрицательный или нет признаков болезни, повторить тест на антитела через 2-3 недели. Например, что же означает, когда ПЦР-тест – отрицательный, а антитела IgG и IgM – положительные? Самостоятельно менять ПЦР-тест на, скажем, ИФА-тест не стоит: точность разных лабораторных методик может сильно различаться. Если вируса нет, а в ПАП-тесте указано «NILM», тестирования раз в 3 года будет совершенно достаточно.
Что такое ПЦР анализ
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики, который позволяет выявить у человека различные инфекционные и наследственные заболевания, как в острой и хронической стадии, так и задолго до того. Расшифровка результатов ПЦР исследований проводится в тот же день, когда получены результаты или в момент обращения к врачу. Чаще всего ПЦР-тест показывает ложноположительный результат из-за наличия в носу или ротоглотке фрагментов уже погибшего вируса, рассказал в интервью Лайфу доктор медицинских наук, практикующий врач, профессор Антон Ершов. Если результат ПЦР отрицательный или нет признаков болезни, повторить тест на антитела через 2-3 недели. Отличие иммуноферментного анализа (ИФА) от полимеразной цепной реакции (ПЦР) в том, что ПЦР относится к прямым методам выявления возбудителя инфекции, то есть позволяет определить РНК вируса SARS-CoV-2 в биоматериале человека.
Маркеры гепатита С и расшифровка результатов количественного анализа HCV RNA
Своевременно определить болезнь и начать лечение поможет анализ ПЦР на гепатит С. Показания к исследованию Когда нужно сдать анализ: если иммуноферментный анализ дал положительный результат; у пациента наблюдаются симптомы цирроза или поражения печени: она меняется в размере, селезёнка становится больше, в области живота видны расширенные вены, кожа желтеет, наблюдаются боли в правой части живота; активность АЛТ и АСТ в анализе крови повышена; перед тем, как начать лечение, для того, чтобы определить количество вируса в крови инфицированного; чтобы следить, насколько эффективной оказалась терапия. После лечения — чтобы контролировать состояние здоровья и избежать рецидива; если диагностирован гепатит В, чтобы исключить смешанное поражение печени; после полового акта с человеком, зараженного гепатитом. Цели обследования Цель ПЦР или полимеразной цепной реакции — изучить состав крови и обнаружить флавивирус гепатит С. Существенный плюс этого анализа в том, что он распознаёт вирус на той стадии, когда он ещё не начал процесс необратимых реакций. ПЦР позволяет увидеть, насколько сильно поражён организм, показывает качественные характеристики и определяет генотип вируса.
Всё это позволяет назначить максимально подходящее лечение для каждого конкретного случая. Разновидности анализов ПЦР на выявление гепатита С подразумевает несколько исследований: качественного анализа; генотипирования. Качественный анализ ПЦР ещё называют качественным анализом. Если он показывает отрицательный результат, значит, распознать вирус в организме нельзя, так как его содержание меньше, чем оборудование может уловить. В такой ситуации нужно определиться, насколько реагент чувствителен, чтобы скорректировать дальнейшее решение.
Анализ может показать положительный результат уже приблизительно через пять дней после того, как человек заразился. Количественный анализ Этот вид исследования анализа демонстрирует уровень вирусной нагрузки, т. Этот вид анализа ПЦР назначается больному перед тем, как начать противовирусную терапию, или после трёх месяцев лечения, чтобы посмотреть, насколько эффективен назначенный курс. Этот вид анализа показывает: насколько велика опасность заразить другого человека, эта вероятность прямо пропорциональна показаниям вирусной нагрузки; какое лечение подойдёт в этом случае, и насколько оно будет плодотворным; длительность лечения — чем выше концентрация вирусов, тем дольше будет терапия.
Это очень удобно, если необходимо протестировать много людей вне медицинского учреждения.
Например, летом 2020 года власти Германии решили бесплатно тестировать таким методом иностранных туристов, которые прибывали в аэропорт. Особенно важно провериться на наличие антител IgG и IgM тем категориям населения, которые контактируют со множеством людей и находятся в группе риска. ПЦР тест Этот вид диагностики коронавируса признан лучшим из-за надежности. Такой тест не только помогает обнаружить носителя инфекции, но и вовремя выявить контактирующих. В 1993 году автор методики полимеразной цепной реакции, Кэри Мюлис, получил Нобелевскую премию по химии.
Ее суть в том, что берется фрагмент ДНК в малой концентрации и значительно искусственно увеличивается при помощи ферментов. PCR считается самым чувствительным, потому что определяет наличие возбудителя и его количество, даже когда содержание минимальное. Анализ этим методом особенно актуальный при бессимптомном течении заболевания. Сдавая ПЦР тест, можно получить еще несколько преимуществ: проверить на генетическом уровне собственное здоровье; выявить вирус на ранней стадии; обнаружить другие вредоносные микроорганизмы. В основе PCR диагностики — технология инвитро in vitro.
Эта методика позволяет проводить эксперимент вне живого организма — в пробирке. Желательно сразу после сна.
Чтобы обнаружить скрытое присутствие вируса герпеса в крови, необходимо сдать анализ на антитела IgG. Противопоказания Соскоб ПЦР не берут во время месячных. Альтернативой может стать анализ крови. Также исследование не проводят во время местной или общей антибактериальной терапии. Подготовка к ПЦР При взятии крови достаточно не употреблять утром пищу.
Исследование проводится натощак. Анализ ПЦР урогенитального мазка предполагает соблюдение следующих рекомендаций: в течение 2-3 дней воздержаться от половой жизни, не спринцеваться, не пользоваться вагинальными препаратами и тампонами, средствами для интимной гигиены с антисептическим действием; после трансвагинального УЗИ, кольпоскопии или биопсии должно пройти не менее 2 дней; в день исследования подмыться теплой водой без применения моющих средств. Соскоб из уретры у мужчин берут не ранее, чем через 2 часа после последнего мочеиспускания. Женщинам анализ следует делать до менструации или через 2-3 дня после ее окончания. Несоблюдение правил подготовки и прием антибиотиков влияют на достоверность исследования. Как сдать ПЦР 12?
Генетический материал вируса можно обнаружить с помощью ПЦР через 10-12 дней после инфицирования — в этот период специфические антитела, которые образуются через несколько месяцев после заражения, отсутствуют и биохимические показатели функции печени находятся в пределах референсных значений.
Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита С и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки с учетом генотипа HCV позволяет контролировать проводимую терапию и прогнозировать течение болезни. Эффективность лечения оценивается по количеству РНК до и во время терапии. Обычно вирусная нагрузка крови снижается в несколько раз за первые три месяца успешного лечения. При эффективной терапии виремия уменьшается на два порядка в первые 4-12 недель лечения и после окончания курса терапии генетический материал вируса в крови не обнаруживается. Отсутствие снижения виремии через 12 недель с начала лечения указывает на его неэффективность. Рекомендовано проводить анализ до начала терапии, на 4-й, 12-й и 24-й неделях лечения и через 24 недели после окончания курса.
Длительность терапии и периодичность количественного определения РНК вируса гепатита С зависит от генотипа вируса и степени повреждения печени. Для чего используется исследование? Для подтверждения диагноза «вирусный гепатит С». Для прогнозирования течения вирусного гепатита С.
ПЦР диагностика - анализ на инфекции (+ видео)
Однако в случае с полимеразной цепной реакцией расшифровка результатов ПЦР исследований мало зависит от биологического материала, который брался у пациента. Гораздо большее значение имеет подготовка к обследованию с помощью метода. В качестве материала могут служить: кровь, сдаваемая в соответствии со стандартными рекомендациями из вены на локтевом сгибе мокрота, собираемая при откашливании налет с ротовой полости, собираемый доктором в утреннее время, пока пациент еще не завтракал и не чистил зубы мазок с половых органов, дающий хорошие результаты в том случае, если больной не мочился в течение нескольких часов, отказывался от сексуальных контактов несколько дней и соблюдал ряд других рекомендаций исследование мочи, при котором биоматериал также предпочтительно собирать с утра, не проводя накануне гигиену половых органов биоптаты органов или тканей, получаемые с помощью специальных инструментов и др. Как отмечают врачи, материалом для ПЦР может быть совершенно любая жидкая среда организма человека. При выборе главное помнить о том, что предпочтение отдают той среде, где с большей долей вероятности будет присутствовать возбудитель.
Например, при половых инфекциях целесообразнее брать мазок с половых органов или кровь, чем мазок из ротовой полости. Решать вопрос о том, какие материалы используются для получения результатов ПЦР в том или ином случае, лучше всего с лечащим врачом на приеме. Доктор сделает оптимальный выбор, исходя из предполагаемого у пациента заболевания. Предположим, доктор поставил себе цель обнаружить какой-то патогенный микроорганизм в теле пациента.
И если тот на самом деле присутствует в теле, он будет обнаружен. При этом спутать его с каким-либо другим патогеном благодаря уникальному коду ДНК будет невозможно. Ведь методика рассчитана, в отличие от многих других диагностических методов, именно на поиск самих возбудителей, а не их следов. Как отмечают доктора, при данном исследовании вероятность случайно принять один возбудитель за другой сводится к нулю.
Зато существует вероятность получения положительных результатов после терапии. Если в организме будут оставаться обломки нуклеиновых кислот. Однозначно положительной реакция чаще всего бывает, если пациент предъявляет жалобы на какие-то конкретные симптомы инфекционного процесса. Причем результат будет сохраняться даже в течение нескольких месяцев после того, как возбудитель будет полностью побежден и удален из организма.
Что значит отрицательный результат ПЦР Если ПЦР результат отрицательный, значительное число пациентов автоматически считают, что они здоровы. Это практически правильное решение. Ведь если итоги оказались отрицательными, значит фрагменты патогенного микроорганизма не были определены тест-системой. Из этого следует логичный вывод, что микроорганизма в теле нет.
Однако стоит учитывать, что несмотря на всю свою высокую чувствительность и специфичность, методика имеет определенный порог чувствительности. Если концентрация возбудителя на момент обследования не переходит границу этого порога, результат будет расцениваться, как отрицательные. Хотя на самом деле окажется ложным до поры до времени. Доктора акцентируют особое внимание на том, что отрицательный результат не всегда означает отсутствие патологии.
Кто из докторов выполняет расшифровку результатов ПЦР Часто среди пациентов звучит вопрос о том, какой врач будет проводить расшифровку ПЦР исследования.
Схема трех стадий полимеразной цепной реакции. Некоторые виды микроорганизмов, например, вирус иммунодефицита человека, хранят генетическую информацию в другой нуклеиновой кислоте — РНК, но и её фрагменты можно находить с помощью ПЦР. Именно на обнаружении этого небольшого, но уникального для каждого отдельного организма участка и построен принцип ПЦР. Для каждого возбудителя создан свой специфический генетический детектор, эталонный фрагмент ДНК, который по принципу комплементарности точно обнаруживает «свой» фрагмент ДНК и запускает реакцию создания огромного количества его копий. Один цикл ПЦР длится около трёх минут, количество копий растёт в геометрической прогрессии. Таким образом, за несколько часов количество фрагментов увеличивается в несколько миллиардов раз. Понятно, что теперь определить, какой возбудитель у данной конкретной инфекции, достаточно легко. Достоинства Теория — это, безусловно, замечательно, но что мы имеем на выходе?
Какую практическую выгоду получает человек, когда отправляется на поиски вредоносных микроорганизмов, вооруженный ПЦР? Безусловно, одно из главных достоинств — это универсальность метода. Оборудование, используемое для ПЦР, стандартно, оно не зависит от того, что именно и где именно мы ищем. Следующий плюс — высокая специфичность. В материале, направленном на исследование, определяется уникальная последовательность нуклеотидов, характерная только для конкретного возбудителя. Кроме того, это позволяет одновременно, в одном и том же материале, проводить поиск нескольких возбудителей без какого-либо ущерба для качества ответа. Метод обладает высочайшей чувствительностью — мы уже говорили о том, что возможно найти всего один фрагмент генетического материала возбудителя. Несомненное преимущество метода — оперативность.
Как выглядит бланк результатов ПЦР анализов?
Первый вариант говорит о наличии инфекционного процесса, вызванного искомым возбудителем. Второй — об отсутствии генетического материала инфекционного агента или его количестве ниже порога чувствительности. Расшифровка результатов ПЦР исследований проводится в тот же день, когда получены результаты или в момент обращения к врачу. Время получения данных анализа составляет от нескольких часов до трех суток в зависимости от лаборатории. Идеальным можно считать вариант, когда от момента первичного обращения к врачу до интерпретации проб проходит не более суток в клиниках, оснащенных современными лабораториями. Однако и она не исключает ложноположительных или ложно отрицательных ответов. В основном это связано с погрешностями при заборе лабораторного материала. Нельзя утверждать, что кровь может быть универсальным материалом для установки диагноза. В идеале должна забираться биологическая проба из предполагаемого места воспаления.
Так, для половых инфекций более актуальным будет исследование соскоба эпителия урогенитального тракта. Ошибки могут скрываться и на этапе обработки исследуемого материала и быть технической погрешностью работы персонала. Таким образом, все достоинства метода нуклеарного поиска инфекции способны раскрыться при использовании качественных реактивов и аппаратуры высоко квалифицированным персоналом. Если вам необходимо сдать анализы на ПЦР исследования, обращайтесь к грамотным венерологам. ПЦР анализ — что это такое, расшифровка диагностики инфекционных заболеваний. Методика ПЦР — популярная диагностика вирусов и бактерий, которая в основе своего исследования берет принципы и научную базу молекулярной биологии. Биоматериал для ПЦР исследования берется с кожи, слизистых, крови, слюны, мочи и т. Эта методика не раз доказала свою эффективность и сверхчувствительность к различным видам возбудителей поэтому многие врачи часто назначают пациентам такие анализы. ПЦР исследование: что это такое?
В чем преимущества и недостатки? ПЦР сейчас повсеместно используют в медицинских клиниках для точного диагностирования вирусов и бактерий. Точное расшифровка названия ПЦР — это полимеразная цепная реакция, которая способна выявлять даже единичные бактерии и вирусы, то есть в очень малых концентрациях. ПЦР исследует всего лишь ДНК вируса и искусственно увеличивает его генетическую информацию методом копирования, используя специальные реагенты, ферменты для каждого вируса и инфекции. Обнаружение чужеродных, нехарактерных участков ДНК- пробы указывает на наличие инфекции. Данная методика быстро и в кротчайшие сроки обнаруживает возбудителя и это значительно уменьшает время и ресурсы врача для постановки диагноза. Исследование проводится буквально 1-2 рабочих дня, чтобы точно ответить на вопрос о наличии или отсутствии инфекционного агента. Таким образом, главное преимущество анализа — это его быстрота, универсальность и высокая чувствительность. Но, однако, нередко пациенты жалуются, что результаты ПЦР-исследования получаются ложноположительными или ложноотрицательными, что подрывает доверие людей к этому анализу.
Однако, дело не в самой методике, которая признана точной и эффективной, а в ряде человеческих и профессиональных факторов, среди которых нужно выделить: Игнорирование пациентом требований врача или правил подготовки к исследованию; Непрофессионализм врача; Недостаточная квалификация медицинского работника медсестра ; Дешевые реагенты лаборатории; Несоблюдение стандартов тест-систем лабораториями. Перед сдачей анализа пациентом должны быть соблюдены определенные требования, чтобы не получить ложноотрицательные результаты. К тому же нередко непрофессиональные врачи или недостаточно квалифицированные работники берут биоматериал не из того участка слизистой или кожи, что приводит к грубым ошибкам исследования.
До процедуры не курить. Также следует предупредить доктора о принимаемых лекарственных препаратах, возможных проблемах со здоровьем, хронических заболеваниях. Забор крови выполняется из вены.
После окончания процедуры место прокола медсестра заклеивает стерильным пластырем, предупреждает о необходимости согнуть руку и держать ее в таком положении 10—15 минут. В противном случае высока вероятность появления болезненной гематомы. Сколько по времени делается исследование? Сколько делается анализ, зависит от лаборатории. Средний срок выполнения колеблется в пределах 1—3 дней. Некоторые клиники предоставляют платную услугу быстрой постановки ПЦР, однако время проведения ограничивается возможностями медицинской аппаратуры.
В поликлинике результаты могут передаваться врачу в течение 7—10 дней. Это связывают с большим наплывом пациентов. При этом биологический материал хранится в соответствии со всеми требованиями. Расшифровка результатов Как правило, расшифровка качественной ПЦР не представляет сложности. Но во избежание ошибочной трактовки, с полученным из лаборатории бланком следует обратиться к врачу. Варианты, что означает та или иная разновидность ПЦР, приведены в таблице.
Вид исследования Возможный результат и предполагаемая расшифровка Качественная ПЦР Отрицательный: человек здоров либо концентрация вирусной РНК в крови слишком мала для детекции. Положительный: человек инфицирован Проводится, если обнаружено РНК вируса качественным методом исследования. В зависимости от того, какие результаты анализов получены, определяется уровень вирусной нагрузки Генотипирование Проводится при гепатите С, подтвержденном другими методами исследования. Анализ позволяет установить точный генотип возбудителя патологии Но нередко возникает ситуация, когда ИФА на гепатит С положительный, а ПЦР отрицательный. Расшифровать такие результаты анализов может только врач. Однако подобные данные возможны в следующих случаях: беременность; перенесенный в острой форме гепатит С; пройденный курс лечения от HCV; наличие инфекций, повышающих вероятность ложноположительного результата ИФА.
Только полимеразная цепная реакция показывает точное наличие вирусной инфекции в организме. Но врачу следует точно установить причину ложноположительного результата. Качественный анализ Анализ ПЦР качественный на гепатит С подтверждает присутствие возбудителя заболевания в крови. Если РНК вируса не обнаружена, человек здоров. Но при подозрении на инфицирование рекомендуют повторно пройти исследование. Положительный результат свидетельствует об инфицировании.
Но этот анализ не позволяет дифференцировать хронический гепатит С от острого, и не может показать, насколько активен патологический процесс. Количественный тест Количественный анализ методом ПЦР проводится после подтверждения диагноза и его расшифровка важна для определения тактики лечения. В зависимости от концентрации частиц возбудителя гепатита С выделяют несколько степеней вирусной нагрузки: средняя, высокая и низкая. Чем больше показатель, тем тяжелее протекает инфекция и сложнее терапия. В норме вирусная РНК отсутствует в крови.
ПЦР анализ: что это такое? На какие 12 инфекций сдается?
ПЦР тест Этот вид диагностики коронавируса признан лучшим из-за надежности. Такой тест не только помогает обнаружить носителя инфекции, но и вовремя выявить контактирующих. В 1993 году автор методики полимеразной цепной реакции, Кэри Мюлис, получил Нобелевскую премию по химии. Ее суть в том, что берется фрагмент ДНК в малой концентрации и значительно искусственно увеличивается при помощи ферментов.
PCR считается самым чувствительным, потому что определяет наличие возбудителя и его количество, даже когда содержание минимальное. Анализ этим методом особенно актуальный при бессимптомном течении заболевания. Сдавая ПЦР тест, можно получить еще несколько преимуществ: проверить на генетическом уровне собственное здоровье; выявить вирус на ранней стадии; обнаружить другие вредоносные микроорганизмы.
В основе PCR диагностики — технология инвитро in vitro. Эта методика позволяет проводить эксперимент вне живого организма — в пробирке. Желательно сразу после сна.
Чем точнее выполняются предписания, тем достовернее получается результат анализа. Чтобы правильно сдать ПЦР на ковид, необходимо заранее подготовиться: За 3-4 часа до прохождения исключить: прием еды, напитков; использование капель в нос, солевых растворов и спреев; курение; чистку зубов; полоскание рта и горла. Если мучает сильная жажда, то разрешается сделать всего несколько глотков обыкновенной воды не менее, чем за 30 минут до взятия мазков.
Суть в том, что с помощью ПЦР удается выявить сам герпес и его штамм, определить характер и давность поражения, патологического процесса. В этом суть диагностики. Гепатит Воспаление печени. Полимеразная цепная реакция назначается не только для определения самого факта расстройства.
Суть в другом. ПЦР диагностика инфекций дает возможность дифференцировать септические и токсические, прочие формы гепатита, определить конкретный штамм вируса, который спровоцировал патологический процесс. Кандидоз Молочница. Вызывается грибком с идентичным названием.
Поражает слизистые оболочки. В том числе полость рта, половые органы женщины реже — мужчины. Вызывает массу осложнений и дискомфортных ощущений. ПЦР тест назначается в качестве верифицируемого, подтверждающего догадки метода, исследуется параллельно с данными анамнеза, визуальной оценки, симптоматики.
Хламидиоз, уреаплазмоз, микоплазмоз и прочие венерические инфекции. На ранних стадиях патологического процесса есть риск не заметить симптомы. Но именно этот момент — лучший для терапии. Поскольку дальше начинаются необратимые изменения в органах и системах.
Болезнь не удается взять под контроль, обеспечить продолжительную жизнь пациенту также невозможно. ПЦР назначается для раннего выявления патологического процесса. Генетические аномалии Любого типа. Потому методика представляет такую ценность для диагностики наследственных аномалий.
Способ не до конца освоен, потому считается перспективным. Как уже было сказано, с помощью методики можно установить отцовство. Используется отдельная модификация анализа. Подготовка к исследованию Меры зависят от того, какой биоматериал будут брать.
Вот некоторые варианты: Моча Изучение урины требуется, когда проводят диагностику мочеполовых инфекций, поражений венерического плана у мужчин и женщин. У первых методика применяется не всегда. Часто ее заменяют забором соскоба из уретры. Перед проведением обследования, накануне запрещена гигиена репродуктивных органов.
Анализ сдают в течение суток с момента подозрительного полового акта. Но это не строгое требование, а скорее рекомендация по раннему выявлению патологического процесса. Кровь Также ее отдельные компоненты: сыворотка и пр. Забирают для определения гепатитов разных форм, дифференциальной диагностики патологий печени, выявления герпеса, СПИДа, также при обследовании на предмет генетических аномалий.
Особых правил подготовки в этом случае нет. Кровь сдают натощак, это единственное требование к пациенту. Мокрота Отделяемое слизистой оболочки дыхательных путей.
Полимеразная цепная реакция бывает двух типов: Качественная — проводится с целью обнаружения патогена в крови обследуемого. ПЦР сдают как для диагностики болезни, так и для мониторинга его лечения. Положительный результат указывает на наличие инфекции в крови больного и об эффективности ПВТ, если таковое было. Отрицательный чаще всего является следствием отсутствия патогена. Количественная — проводится после установки диагноза с целью вычисления уровня вирусной нагрузки.
Чем выше итоговый показатель, тем серьезнее болен человек. Сдать анализ можно в профильном медицинском учреждении Москвы и других городов России. Кому рекомендуется сдавать ПЦР? Полимеразная цепная реакция одно из наиболее точных исследований, позволяющих выявить вирусный гепатит С. Сдавать его стоит следующим группам лиц: людям, у которых наблюдаются характерные для ВГС симптомы; беременным женщинам на любом триместре; больным, регулярно проходящим процедуру диализа; пациентам, недавно пережившим операционное вмешательство; инъекционным наркоманам; посетителям татуажных или маникюрных салонов; медицинским работникам и лаборантам, регулярно контактирующим с инфицированными выделениями; членам семей, в которых проживает зараженный пациент.
Запомнить ПЦР-тесты помогают обнаружить фрагменты генетического материала бактерий, вирусов или других людей. Но для каждого микроорганизма реактив нужен свой, так что универсальных тестов ПЦР на все инфекции сразу не бывает. Подготовка к анализу зависит от того, какой биологический материал вы сдаете. Если кровь, то особо готовиться не надо. Для других материалов есть несложные правила — если их соблюдать, анализ будет точнее.
Антитела к вирусу гепатита С
Как расшифровать качественный тест на антитела к коронавирусу. Расшифровка результатов ПЦР-анализа на папилломавирус, Digene-теста и их разновидностей не отличаются, поскольку количество микроорганизмов и их тип не зависит от метода обнаружения. HCV, РНК [реал-тайм ПЦР]: описание, синонимы, методы исследования, какой биоматериал можно использовать, как правильно подготовиться, для чего используется, когда назначается, что означают результаты. Результаты ПЦР – когда готовы, расшифровка. Опытный венеролог: как быстро получить результаты анализов ПЦР. Молекулярное тестирование, включая тестирование с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР), выявляет генетический материал вируса и, таким образом, может определить, инфицирован ли человек SARS-CoV-2 в настоящее время. ПЦР или полимеразная цепная реакция является золотым стандартом в диагностике многих инфекций.
Маркеры гепатита С и расшифровка результатов количественного анализа HCV RNA
| Результаты ПЦР | ПЦР-анализ, в отличие от теста на выявление антител, должен определить, присутствует ли вирус в организме прямо сейчас, или пациент перенес инфекцию в прошлом. |
| Что такое анализ ПЦР и как его проводят | Что такое ПЦР, как работает метод ПЦР в диагностике, преимущества методики, показания, подготовка к проведению ПЦР-анализа, как проводится ПЦР-анализ, что показывают результата теста. |
Анализ ПЦР 12 инфекций
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) является «золотым стандартом» диагностики вирусного гепатита С. Высокая чувствительность теста позволяет выявлять генетический материал вирусов (РНК) даже если их в исследуемом материале единицы. Чтобы это сделать, мы разрабатываем ПЦР-тест, который будет «смотреть» конкретно этот вариант из всего генома, есть он у человека или нет. ПЦР-тест (Мазок) на Коронавирус. Предназначение у него одно: определить есть ли вирус COVID-19 в организме в данный момент (Real-Time PCR). ПЦР-анализ, в отличие от теста на выявление антител, должен определить, присутствует ли вирус в организме прямо сейчас, или пациент перенес инфекцию в прошлом.
Маркеры гепатита С и расшифровка результатов количественного анализа HCV RNA
Кому показаны тесты на определение антител к новой коронавирусной инфекции - Тем, кто хочет узнать, перенес он инфекцию или нет независимо от того, были признаки простуды или не было. Только следует понять, что если были подозрительные признаки, целесообразнее обследоваться на IgG спустя 5 недель от предполагаемого периода. Если признаков не было, сроки неважны, обследуйтесь в любое время. Иногда такое бывает. Это комплексный тест, определяет иммуноглобулины классов М и G, результат по каждому антителу. Выполняется иммунохроматографическим методом ИХГА. Возможен ложноположительный результат при хронических заболеваниях Поэтому целесообразно провести исследование мазка из зева методом ПЦР. Если результат ПЦР отрицательный или нет признаков болезни, повторить тест на антитела через 2-3 недели.
IgA — показатели ранней инфекции, являются более точными в отличие от IgM, поскольку более специфичны. Как правильно прочитать результат Положительный результат — более 1,1. Говорит об обнаружении IgA и может означать: Текущую инфекцию сейчас в частности, бессимптомное течение Если одновременно определяются IgG, то это период выздоровления или недавно перенесенная инфекция Пограничный результат — в интервале 0,8 — 1,1. Требует повторного исследования через 2 недели, поскольку может означать: - Начальный период инфекции, когда не успели сформироваться антитела в достаточном количестве. Как правило, в таком случае есть признаки болезни и требуется подтверждение методом ПЦР мазок из зева. Тогда через 2 недели будет отмечаться нарастание IgA. Отрицательный результат —менее 0,8.
При случайном незащищенный половом контакте только ПЦР поможет поставить диагноз на ранней стадии, если человек заразился каким-либо заболеванием. А также женщины, только планирующие беременность. Хотя ПЦР является максимально эффективным методом диагностики, зацикливаться только на нем не стоит. Обследование пациента при любом заболеваний должно носить комплексный подход. Если цепная полимеразная реакция позволяет выявить возбудителя, то серологическое исследование позволяет оценить эффективность лечения, реакцию организма на возбудителя и лекарства.
Назначать все исследования должен врач по показаниям. Увидеть, как выполняется анализ крови ПЦР, вы сможете, просмотрев данный видео-обзор: Гудков Роман, врач-реаниматолог 67 голос.
Это делается для того, чтобы праймер гибридизовался с комплементарной цепью всей своей длиной; тогда как при оптимальной температуре отжига, праймер частично гибридизуется с комплементарной цепью. Частичная гибридизация праймера на геномной ДНК приводит к неспецифической амплификации, если участков связывания для праймера достаточно много. В точках, содержащих анализируемую ДНК, происходит амплификация с образованием молекулярных колоний. Вторая полимераза необходима для коррекции ошибок, внесённых первой, так как Taq-полимераза останавливает синтез ДНК, если был добавлен некомплементарный нуклеотид. Этот некомплементарный нуклеотид удаляет Pfu-полимераза. Смесь полимераз берётся в отношении 50:1 или даже меньше 100:1, где Taq-полимеразы берётся в 25—100 раз больше, чем Pfu-полимеразы.
RAPD Random Amplification of Polymorphic DNA [en] , ПЦР со случайной амплификацией полиморфной ДНК — используется тогда, когда нужно различить близкие по генетической последовательности организмы, например, разные сорта культурных растений, породы собак или близкородственные микроорганизмы. В этом методе обычно используют один праймер небольшого размера около 10 п. Этот праймер будет частично комплементарен случайным участкам ДНК исследуемых организмов. Подбирая условия длину праймера, его состав, температуру и пр. Групп-специфическая ПЦР group-specific PCR — ПЦР для родственных последовательностей внутри одного или между разными видами с использованием консервативных праймеров к этим последовательностям. Например, подбор универсальных праймеров к рибосомальным генам 18S и 26S для амплификации видоспецифического межгенного спейсера: последовательность генов 18S и 26S консервативна между видами, поэтому ПЦР между этими генами будет проходить для всех исследуемых видов. Противоположностью этому методу является уникальная ПЦР unique PCR , где задача состоит в подборе праймеров для амплификации только одной последовательности изо всех родственных.
Различают такие виды экспресс-теста: исследование методом иммунохроматографии, использование набора реагентов. В первом случае человеку предлагается сдать кровь в медицинском учреждении. У анализа есть преимущества: низкая цена по сравнению с ПЦР; высокая скорость до получаса ; простота реализации. Однако точность его вызывает сомнения. Экспресс-анализ показывает только присутствие компонентов вируса, а не его самого. Поэтому все положительные пробы важно перепроверять методом ПЦР. С экспресс-наборами например, Standard Q Covid-19 человек работает сам. Это не аналог иммунохроматографии: кровь здесь не понадобится, достаточно мазка из носоглотки. Что именно нужно делать — написано в инструкции. При контакте биоматериала с реагентом происходит реакция с окрашиванием как с тестом на беременность. Такое исследование на коронавирус достаточно быстрое до 20 минут , однако не слишком точно. Тест на антитела Антитела к коронавирусу, выявленные в организме, показывают его реакцию на возбудитель. Если он вырабатывает специфические иммуноглобулины, это может означать, что: человек переболел COVID-19 в том числе бессимптомно ; антитела способны бороться с вирусом в случае его повторного проникновения в кровь; человек может быть донором и спасать других зараженных, кто переносит заболевание тяжелее. Если тестирование показало, что антитела к коронавирусу присутствуют, это еще не значит, что их носитель больше никогда не заболеет. Хотя статистика имеется небольшая, вирусологи пришли к выводу, что положительный тест на антитела может ненадолго приравниваться к вакцинации. Однако это справедливо в течение полугода после выявления инфекции. По истечении этого срока вновь появляются риски, и пациенту рекомендована прививка. Как расшифровать анализ на антитела? Обследуемый на антитела может иметь в организме несколько видов белков, вырабатываемых иммунной системой: IgM — реакция на любую острую инфекцию. Обычно присутствуют в организме в течение месяца после заражения, однако при COVID-19 этот срок увеличивается до 3 месяцев. Могут сохраняться даже в отсутствие вируса. Их количество должно снижаться по мере выздоровления. IgG — запоминающая реакция организма на перенесенную инфекцию. Синтезируются через 6 недель после заражения и формируют иммунитет.